2020年9月22日火曜日

よう知らんが PCR検査関連メモ

 

よう知らんが この引用の方が 正しいのだと思う

調べる労力が無駄なんで生物学 知らん 俺の断定だが


そのようなボケ老人を利用する 

音楽youtuber 宗教家気取りを褒めたたえる井口博士は切り捨て 


冒頭だけ見たとき

マスクは しないでいいんだけど

御上がライブハウスでは マスクしろというから

マスクしない人は 入れないといってたヘタレ音楽家宗教家気取り



https://twitter.com/koichi_kawakami/status/1288082337977131008

PCRの発明者Kary Mullisが「PCRは検査に使えないと言った」と言う言説を見かけます。このデマは日本だけでなく海外でも広められたようで、ロイターがファクトチェックしていました


井口博士リンク

https://quasimoto3.exblog.jp/





https://twitter.com/zionadchat/status/1308515524343595008



ちゃんと書いとくが

俺は 無駄にPCR検査するのに否定派
金持ちが安心求めて やるのは放置

沖縄知事が 沖縄観光産業守るのに
日本政府に 飛行機 乗ってくるもの全員に
PCR検査しろなんて ほざいてるんだから

沖縄捨てたらどうかね

俺は日本民族主義者じゃないけど
沖縄 おかしいだろ

https://twitter.com/zionadchat/status/1308522917777432576



【コロナ】 米国の死者20万人超える ★2 [ブギー★]
https://asahi.5ch.net/test/read.cgi/newsplus/1600797401/


22不要不急の名無しさん2020/09/23(水) 03:15:25.92ID:FdSuLk370
【デタラメ大橋誠お爺ちゃん!コロナの病原性は確定してますよ!】その1

【武漢論文に出てくるウイルスは「ショットガンシーケンス」という手法で人工的に作られたキメラウイルスだ!】
違う。武漢で使われた手法は「RNAシーケンス」であり、この時点で武漢論文を読んでない事がモロバレ。
しかもショットガンシーケンスは一世代前の古い手法であり、最新の手法は何も知らない恥ずかしい大橋お爺ちゃん(笑)

【人工的に作られたキメラウイルスである事には変わりない!細菌や常在ウイルスが混じってる可能性がある!】
RNAシーケンスはそんな単純なモノじゃない。平均で604本ものリード(75~100塩基)が積み重なって何重にもチェックされており
細菌等などの余計な配列が入り込む余地はない。残念でした(笑)

【病巣部からウイルスを取ってきていない!病巣部は肺胞の外側ではなくて内側だ!】
肺胞の上皮細胞は、外気と血液のガス交換のため、非常に薄い『膜』を形成している。
ほとんど単層(細胞が重なっていない状態)だから、その内側という発言も意味不明ですよ。
人前で偉そうな事を言う前に組織学ぐらい勉強しようね老ボケお爺ちゃん!

【分離クローン化が済んでいない!】
武漢論文で既に達成されている。
武漢ウイルス研究所の研究者らは、気管支肺胞洗浄液(BALFを遠心分離機にかけ、遠心力で雑多な細胞の破片等を除き、
さらにその上澄みを濾過して分離したウイルスを、培養細胞(Vero E6細胞)に感染させた。
細胞培養液中に存在する遺伝子を調べた結果、 99.99% が新型コロナウイルス由来でした(つまり分離クローン化成功)。
このクローンは、WIV04(GenBank: MN996528.1)と名付けられネット上で全ゲノム配列の確認可能。


23不要不急の名無しさん2020/09/23(水) 03:15:38.70ID:FdSuLk370>>27
その2
【サルの感染実験が済んでいない!】
済んでいる。
NIHの研究者らは、アカゲザル8頭に、クローン化された新型コロナウイルスSARS-CoV-2『nCoV-WA1-2020』(※←ネット上で全ゲノム確認可能)を接種した。
その結果、SARS-CoV-2を接種した全てのサルで、人間の中等度に相当する呼吸器疾患が、感染後8~16日目にかけて見られた。

【その動物から同じウイルスが再分離されていない!】
済んでいる。
サルの気管支肺胞洗浄液(BALF)中から分離したウイルスを培養細胞に感染させている。、遺伝子だけでなく、『ウイルスの存在』が証明されたわけ。
つまりコッホ4原則である1. 患者からその菌の存在を証明する。2. その菌を分離培養する(純培養)。
3. その菌を動物に接種し、類似症状が引き起こされる。4. その動物から同じ菌が再分離される。の全てが満たされ
見事に新型コロナウイルスの病原性は確定しました!もう言い逃れ出来ないね大橋お爺ちゃん!

【ぐぬぬぬ!ワシは認めぬ!】
Nature誌のようなトップジャーナルでも紹介された。世界中の学者が認めている証拠。
Virus-specific nucleotide-positive and viral-protein seroconversion was observed in all patients tested and provides
evidence of an association between the disease and the presence of this virus.
訳)新型コロナウイルス特異的なヌクレオチド陽性(=PCR陽性)および、ウイルスタンパク質セロコンバージョンは、
テストされた全ての患者で観察され、(このことは)疾患と、このウイルスの存在との関連を証明している。
どこぞの誰かのようにユーチューブで怪しい主張を垂れ流してるのとは違う。ネイチャーですよ!ネイチャー!


24不要不急の名無しさん2020/09/23(水) 03:16:28.27ID:FdSuLk370
【PCRの原理も理解してないデタラメ大橋お爺ちゃん!PCR検査凄いぞ編】その1

【コロナRNAは3万塩基もあるんだ!たかだか300塩基程度で何が分かるんだ!】
1つのプライマーは20塩基前後のDNA。これが目的の遺伝子に結合する(結合するように設計する)。
DNAはアデニン(A)、チミン(T)、グアニン(G)、シトシン(C)の4種類の塩基からなり、AはTと、GはCと結合する。
そのため、目的の遺伝子以外でこの20塩基のプライマーの結合する配列と全く同じ配列が現れる確率は、1/4の20乗、約1兆分の1。

【ほら見た事か!ヒトゲノムの配列と一致する配列を見つけたぞ!】
新型コロナウイルスは、RNAウイルス。
検体(咽頭ぬぐい液や唾液)から精製したRNAサンプル中にはゲノムDNAは含まれない。
DNA分解酵素(DNase)を添加することにより、サンプルからDNAを完全に除去している。
したがって、BLAST(GGGenome)で、ヒトゲノム(染色体)を検索して、
プライマーと一致する・結合する配列を見つけることは、全く意味のないこと。

【それでも万が一リバースプライマー、フォワードプライマーとプローブが結合したらどうするんだ!】
100億万歩譲って仮に同じ遺伝子上に、この3つが結合する配列が見つかったとしても、その『並び』にも気を付けなければならない。
DNAには『向き』がある。DNAを構成する2本の鎖は逆平行になっている。
5’末端→3’末端という方向性があり、一方の鎖の5’末端側には他方の鎖の3’末端側が並び、3’末端側には他方の鎖の5’末端側が並ぶ。
この2本の鎖を、それぞれセンス鎖(5’?????3’)とアンチセンス鎖(3’?????5’)と呼ぶ。
PCRでは、1つのプライマーが鋳型DNAのアンチセンス鎖に、もう1つのプライマーが鋳型DNAのセンス鎖に結合することで、
この区間の配列が増幅される。この位置関係が大事!
さらに、リアルタイムPCRであれば、TaqManプローブがその間に結合しなければ検出できない。


25不要不急の名無しさん2020/09/23(水) 03:16:57.41ID:FdSuLk370
【PCRの原理も理解してないデタラメ大橋お爺ちゃん。PCR検査凄いぞ編】その2

【増幅回数は何回だ?最初にDNAは何本あったんだ?分からない!偽陽性が出てしまう!】
増幅回数は分かっている。そもそも『リアルタイムPCR』ではその名の通り、
リアルタイムで、PCRによりDNAが増幅されている様子を”見る”ことができる方法。
それを可能にするのが、『TaqManプローブ(TaqMan probe)』と呼ばれるもので、
リアルタイムPCRでは、DNAポリメラーゼ、プライマーに加え、このTaqManプローブが重要な働きをする。
詳細は省くが、最終的な増幅回数はあまり意味が無い。重要なのは『増幅曲線』の途中を調べることが重要となる。

【PCRで一般コロナを誤って検出している!】
3つのプライマー/プローブセットは、ORF1ab遺伝子、N Protein遺伝子、及びS Protein遺伝子領域内を対象としている。
これら3種の遺伝子領域はGISAIDで登録されている数万種類のSARS- CoV-2のゲノミックRNAにおいて100%保存されており、
一方、NCBIに登録されているSARS-CoV-2以外の2116種類のコロナウイルスとは相同性が低い領域のため、
極めて特異的にSARS-CoV-2を検出することができる。

20230112 memo

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